miR－93对骨肉瘤细胞株增殖和凋亡的影响

王瑞金(同济大学医学院人体解剖与组织胚胎学系,上海,200092);时扣荣(上海市第七人民医院药剂科);张军(同济大学医学院人体解剖与组织胚胎学系,上海,200092);张敬(同济大学生命科学与技术学院生物学系);高戎戎(同济大学生命科学与技术学院生物学系);朱世长(同济大学医学院人体解剖与组织胚胎学系,上海,200092);

阅读：431 中华病理学杂志； 2016年45卷12期

摘要

目的：探讨miR－93对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法采用即时定量PCR法检测骨肉瘤细胞株143B、HuO9、Saos2、MG63、U2OS和G292和人成骨细胞系hFOB1．19中miR－93的表达水平，免疫印迹法检测裸露角质蛋白2（ NKD2）的表达水平。脂质体转染构建miR－93低表达的143B和HuO9细胞，四甲基偶氮唑盐比色法检测转染后细胞的增殖情况，流式细胞术检测其凋亡情况。利用荧光素酶报告基因实验检测miR－93对NKD2的靶向作用，过表达NKD2，分析NKD2对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果 miR－93在骨肉瘤细胞系中明显高表达，NKD2显著低表达。转染miR－93抑制剂后明显抑制了143B和HuO9细胞的增殖，促进其凋亡。荧光素酶实验证实NKD2是 miR－93的直接靶基因， NKD2过表达抑制骨肉瘤细胞增殖，促进其凋亡。结论miR－93通过靶向抑制NKD2的表达促进骨肉瘤细胞增殖，抑制其凋亡，这对更深入探索骨肉瘤的诊断和治疗有着重要意义。

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