子宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌组织cyclin D1表达特征及其与HPV16 E7表达的相关性分析

王平(河北北方学院);刘珊(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);程波(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);吴西钊(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);丁姗姗(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);武迪(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);许琳(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);石建玲(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);段恋(第二炮兵总医院病理科,北京,100088);

阅读：570 中华病理学杂志； 2015年44卷12期

摘要

目的探讨cyclin D1在宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌中的表达及其与HPV16 E7基因表达的相关性.方法 SiHa、Hcc94细胞均为宫颈上皮来源的鳞癌细胞,其中Hcc94细胞的E6/E7基因缺失.采用即时荧光定量PCR、免疫组织化学法检测cyclin D1在子宫颈上皮内瘤变(CIN)及鳞状细胞癌组织中基因及蛋白的表达情况;采用逆转录PCR(RT-PCR)、Western blot、免疫组织化学方法检测cyclin D1在不同E7表达状态的鳞状细胞癌细胞系的表达情况;设计靶向HPV16 E7基因启动子区的siRNA序列,构建质粒转染SiHa细胞,筛选稳定沉默E7基因的细胞系命名为cm-16细胞株;将空质粒转染SiHa细胞,获得空质粒细胞系命名为B3细胞株.用RT-PCR和Western blot检测E7沉默cm-16细胞cyclin D1基因及蛋白表达情况.结果 cyclin D1仅在正常宫颈鳞状上皮副基底细胞中表达,在CIN1、CIN2、CIN3表达降低,在HPV阳性的宫颈鳞状细胞癌中阴性或少量点灶状表达;cyclin D1在E7阳性SiHa细胞中的表达水平较cm-16及Hcc94细胞减低(均P＜0.05).结论 E7高表达的子宫颈癌组织及细胞中cyclin D1低表达,HPV E7基因抑制子宫颈癌cyclin D1表达.

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