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实时荧光定量PCR是检测结直肠癌BRAF V600E突变的理想方法

王丛阳[1]郭文文[1]王家俊[1]熊林[1]金宁[1]王焱[1]

摘要

目的 应用免疫组化和实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)技术检测结直肠癌中BRAF V600E突变,比较这两种技术在结直肠癌中的应用价值.方法 总结113例结直肠癌标本BRAF V600E免疫组化和qRT-PCR的结果 ,以测序为金标准,评价这两种技术在结直肠癌BRAF V600E突变检测中的应用价值.结果 113例结直肠癌标本中,免疫组化检测阳性19例,阴性82例,不确定诊断12例.其中19例阳性标本经测序确认BRAF V600E突变6例,未突变13例;12例不确定诊断病例经测序确认1例突变,11例未突变.免疫组化阳性检出率为16.81%,阴性检出率为72.57%,不确定诊断例数占检测例数的10.62%.113例结直肠癌标本同时行qRT-PCR检测,结果 突变7例,未突变106例,阳性检出率为6.19%,阴性检出率为93.8%,无不确定诊断,与测序结果 一致,符合率达100%.以测序为金标准,比较这两种技术在结直肠癌检测BRAF V600E中的应用价值,免疫组化和qRT-PCR技术的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、假阴性率、假阳性率、准确率分别为100%、86.32%、31.58%、100%、0、13.68%、87.13%和100%、100%、100%、100%、0、0、100%.经配对χ2检验这两种检测方法差异有显著性(P<0.00001).结论 在结直肠癌BRAF V600E检测中,qRT-PCR较免疫组化有更高的准确性.

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