摘要
目的 探究人谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)对肾透明细胞癌增殖转移能力的影响及其与IGF-1R、COX-2表达的关系.方法 体外培养人正常肾小管细胞系HK-2及人肾透明细胞癌细胞Caki-1、A498、Caki-2、786-o,即时荧光定量PCR技术(RT-PCR)及蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测不同细胞系中GPX4 mRNA及蛋白表达,通过慢病毒转染法构建过表达GPX4细胞系,包括:空白载体组及GPX4过表达组,及干扰GPX4肾透明细胞癌细胞系,包括:对照序列组、GPX4干扰1组及GPX4干扰2组,RT-PCR检测各组细胞GPX4、IGF-1R及COX-2 mRNA表达水平,Western blot检测各组细胞GPX4、IGF-1R及COX-2蛋白表达水平,CCK-8实验检测各组细胞0、24、48、72及96 h相对增殖能力,Transwell侵袭及迁移实验检测各组细胞侵袭及迁移能力.结果 相比人正常肾小管细胞系, GPX4在肾透明细胞癌细胞系中高表达;GPX4过表达组细胞相比空白载体组细胞GPX4、IGF-1R及COX-2 mRNA及蛋白表达显著增高,GPX4干扰1组及GPX4干扰2组细胞相比对照序列组细胞GPX4、IGF-1R及COX-2 mRNA及蛋白表达显著降低;GPX4过表达组细胞相比空白载体组细胞72及96 h增殖能力显著增高,GPX4干扰1组及GPX4干扰2组细胞相比对照序列组细胞72及96 h增殖能力显著降低;GPX4过表达组细胞侵袭及迁移细胞数显著高于空白载体组细胞,GPX4干扰1组、GPX4干扰2组细胞侵袭及迁移细胞数显著低于对照序列组细胞.结论 GPX4在肾透明细胞癌细胞中高表达,与IGF-1R及COX-2的表达正相关,并可促进细胞体外增殖及转移能力.
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