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Survivin在Mpp+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡过程中的作用

刘梦(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);朱英(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);熊进成(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);马若翔(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);肖翾(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);胡玉树(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);李剑波(重庆医科大学基础医学院法医学教研室,重庆,400016);

摘要

目的 探讨存活素(Survivin)能否抑制(1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的神经元(SH-SY5Y细胞)的凋亡过程.方法 运用1 mmol/L MPP+处理SH-SY5Y细胞,诱导其发生凋亡,建立帕金森病的细胞模型,采用不同浓度的Survivin进行预处理,使用倒置显微镜观察细胞形态,采用MTT法、Real-time PCR、Western blot检测相关指标,进而评价Survivin对SH-SY5Y凋亡的作用.结果 1 mmol/L MPP+作用24h可诱导SH-SY5Y的凋亡,显著降低细胞存活率(F=13.32,P=0.000).MPP+作用前,预先经Survivin处理2h的SH-SY5Y细胞的存活率显著提高(F=13.32,P=0.000,P =0.000,P=0.000),并呈剂量依赖性关系.Real-time PCR结果显示Survivin能够显著抑制SH-SY5Y细胞中凋亡蛋白Caspase 3和Caspase 9的表达水平(F=61.57,P=0.000,P=0.000,P=0.000;F=54.26,P=0.001,P=0.000,P=0.000);Western blot结果亦显示Survivin能够显著抑制SH-SY5Y细胞中凋亡蛋白Caspase 3和Caspase 9的表达水平.结论 Survivin能够剂量依赖性地抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与阻断Caspase信号通路相关.

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