激光捕获显微切割细胞的全基因组DNA扩增

王振宁(第一临床学院肿瘤科,110001);马琳(110001,沈阳,中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室);徐惠绵(第一临床学院肿瘤科);姜莉(110001,沈阳,中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室);张成洪(110001,沈阳,中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室);何向民(110001,沈阳,中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室);陈峻青(第一临床学院肿瘤科);张学(110001,沈阳,中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室);

阅读：523 中华病理学杂志； 2002年31卷1

摘要

篇首：组织是多种细胞群体相互作用、相互依存的三维空间结构,这使得在相当长的一段时间内难以准确、深入地从分子水平研究某类特定细胞基因结构和功能的动态变化.肿瘤组织包括瘤细胞、其发源的正常细胞、淋巴细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等多种成分.在肿瘤分子病理学和基因组学研究中,排除非肿瘤细胞污染对实验结果的影响尤为重要[1].激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)是在显微镜下从组织切片中分离、纯化单一类型细胞群或单个细胞的技术[2].它能有效地解除组织中细胞异质性造成的偏差.但从LCM获得的有限细胞中提取的微量DNA难以满足多基因、多位点、多次检测的需求,特别是以DNA芯片为代表的高通量检测的需求.在本研究中,我们通过LCM从癌组织中精确分离目的细胞结合高可信度全基因组扩增技术(high fidelity-whole genome amplification,HF-WGA),建立一种从微量同质细胞中制备足够量基因组DNA用于多次聚合酶链反应(PCR)检测的方法,以提高实验结果的可重复性、可信性、可比性及后续工作的效率.

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