油红O染色法在2D和3D细胞培养原代胰腺星形细胞鉴定中的应用
摘要
目的 通过油红O染色分别在2D和3D细胞培养中观察及鉴定活化和去活化的原代胰腺星形细胞(PSCs).方法 使用爬出法从新鲜胰腺癌组织中培养原代PSCs,2D培养于普通细胞培养板中进行,3D培养在Matrigel基质胶中进行.使用全反式维甲酸(ATRA)连续处理PSCs 7天,获得去活化PSCs.使用油红O法分别对2D培养和3D培养的活化和去活化PSCs进行染色.结果 在2D培养中,未处理的PSCs呈活化状态,星芒状,胞质几乎无油红O着色;ATRA处理的PSCs处于去活化状态,呈椭圆形或多角形,胞质中可见较多橘红色颗粒着色.在3D培养中,Matrigel胶滴呈半球形,胶滴中的PSCs为椭圆形,PSCs未经ATRA处理胞质中即有较多橘红色颗粒,维持去活化状态.结论 油红O染色可以在2D和3D细胞培养中鉴定原代PSCs的活化和去活化状态,且PSCs在3D环境中生长可维持去活化状态.
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