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Beclin1和HLAⅠ、Ⅱ在人卵巢癌SKOV3细胞中的表达

纪晓坤[1]王学利[1]王珩[1]赵银环[1]吴家宁[1]王蕊[1]吴娟[1]杜芸[1]

摘要

目的 探讨转染Beclin1质粒的自噬基因Beclin1和免疫应答效应分子HLA Ⅰ、Ⅱ在人卵巢癌SKOV3细胞中的表达,分析Beclin1在卵巢癌免疫应答中的作用.方法 应用基因转染技术、RT-PCR、Western blot法检测Bechn1质粒转染SKOV3细胞前后Beclin1和HLA Ⅰ、Ⅱ的mRNA和蛋白表达水平的变化.应用免疫荧光显微镜观察Beclin1质粒转染SKOV3细胞后,其自噬小体的变化.用MTT法检测Beclin1质粒转染SKOV3前后细胞的增殖活性.结果 SKOV3细胞转染Beclin1质粒后,Beclin1的转录和翻译水平分别是空载体组的5、2倍.荧光显微镜观察,转染Beclin1质粒组卵巢癌细胞MDC标记的自噬小体数量显著增多.RT-PCR和Western blot结果显示,转染Beclin1可诱导HLA Ⅰ、Ⅱ等位基因的转录和翻译.Beclin1质粒组的HLA Ⅰ-A、B、C和HLAⅡ-DP、DQ、DR的mRNA分别是空载体组的2、1.6、3倍和2、6、3倍;其HLA Ⅰ、Ⅱ的蛋白表达分别是空载体组的2、1.6倍.MTT结果显示,Beclin1质粒组与空载体组、空白对照组相比,在转染24、48、72、96 h后,其细胞生长抑制率分别为42.6%、37.8%、24.35%、14.81%.结论 在人卵巢癌SKOV3细胞中,转染外源性Beclin1可诱导细胞自噬并使免疫应答效应分子HLA Ⅰ、Ⅱ的表达增加.HLA Ⅰ、Ⅱ表达的增加可能使卵巢癌细胞免疫应答增强.转染外源性Beclin1可抑制卵巢癌SKOV3的细胞增殖.

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