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沉默RORα通过Wnt信号通路促进人胃癌细胞增殖与迁移侵袭

刘芳(南华大学肿瘤研究所,湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,湖南衡阳421001);赵晓红(南华大学肿瘤研究所,湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,湖南衡阳421001海南省妇幼保健院妇产科,海口570206);夏红(南华大学肿瘤研究所,湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,湖南衡阳421001);苏坚(南华大学肿瘤研究所,湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,湖南衡阳421001南华大学附属第二医院,湖

摘要

目的:在构建沉默RORα人胃癌MGC803细胞的基础上,观察沉默RORα对MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。方法:软琼脂集落形成实验、流式细胞术、细胞迁移和侵袭实验检测RORα沉默对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。RT-PCR与Western blot检测RORα、Wnt1、MMP-9与TIMP3 mRNA与蛋白表达。结果:集落形成实验显示,沉默组的集落形成率128.1%明显高于对照组和空载体组(P<0.05)。流式细胞术显示,沉默组S期细胞百分率39.9%较对照组26.1%和空载体组27.4%明显增加(P<0.05)。迁移实验显示,沉默组迁移距离(1.76±0.19) mm明显高于对照组(1.32±0.14) mm和空载体组(1.29±0.17) mm (P<0.05)。侵袭实验显示,沉默组穿膜细胞(172±27)个明显多于对照组(147±17)个和空载体组(149±14)个(P<0.05)。RT-PCR与Western blot表明,沉默RORα可显著上调Wnt1与MMP-9 mRNA与蛋白与下调RORα与TIMP3 mRNA与蛋白。结论:沉默RORα可通过Wnt信号通路上调MMP-9和下调TIMP3促进MGC803细胞增殖与迁移侵袭。

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