小鼠肝脏窦状内皮细胞分离和培养的一种新方法

赵秀华(中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078);罗彬(中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078);罗盘(中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078);程腊梅(中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078);

阅读：454 临床与病理杂志； 2010年30卷1

摘要

目的:建立小鼠肝窦状内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells, LSEC)的分离培养方法, 研究其生物学特性.方法:中性蛋白酶消化小鼠肝脏组织,Percoll密度梯度离心分离消化后的细胞悬液,用内皮细胞筛选培养基及酶差异消化法纯化LSEC;免疫细胞化学染色检测LSEC的表面标志,分析LSEC的超微结构,观察DiI荧光标记的乙酰低密度脂蛋白(acetylated-low density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)摄取能力,以体外成血管能力分析LSEC的功能.结果:分离纯化后的细胞呈典型鹅卵石样内皮细胞形态,这些细胞表达VIII因子,不表达CD31,CD90和CK19,具有窦状内皮细胞特征性的窗孔结构;能摄取DiI-Ac-LDL,并有一定的成血管能力.结论:建立了一种分离、培养LSEC的方法,为研究LSEC的功能奠定了基础.

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