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体外获得高纯度大鼠背根神经节神经元的原代培养

谭洪毅(中南大学湘雅医院呼吸内科,长沙,410008);潘频华(中南大学湘雅医院呼吸内科,长沙,410008);胡成平(中南大学湘雅医院呼吸内科,长沙,410008);

摘要

目的:建立一种切实可行的胚胎大鼠背根神经节神经元培养及纯化方法.方法:用显微解剖获取足够数量的胚胎大鼠背根神经节,通过胰蛋白酶+EDTA消化、交替使用NB培养基与加入了5-氟-2-脱氧尿嘧啶核苷酸/尿苷的抗有丝分裂NB培养基等方法,在体外获得纯化的背根神经节神经元,采用神经丝蛋白免疫细胞化学染色法与DAPI染核的方法鉴定并测定神经元的纯度.结果:获得的背根神经节神经元在体外生长良好,纯度可达到96%以上.结论:本实验方法可以获得大量高度纯化的大鼠背根神经节神经元.

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