蛋白质组学技术分析5-aza-2dC处理白血病细胞HL-60前后的差异表达蛋白质

谭潭(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);梁婷(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);汤参娥(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);肖艳华(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);易红(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);张鹏飞(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);彭芳(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实

阅读：398 临床与病理杂志； 2009年29卷2

摘要

目的:研究甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycitydine, 5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞HL-60细胞蛋白质表达谱的影响,探讨5-aza-2dC抗急性髓系白血病作用的机制.方法:采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离5-aza-2-dC处理与未处理HL-60细胞的总蛋白质,PDquest 图像分析软件识别差异蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点. 然后采用Western 印迹检测差异蛋白质半乳糖凝集素1(Galectin-1) 在药物处理与未处理HL-60细胞中的表达水平.结果: 建立了5-aza-2dC 处理与未处理HL-60 细胞蛋白质的2-DE 图谱,识别了35个差异表达的蛋白质点,鉴定了27个差异表达的蛋白质,其中包括Galectin-1在内的21个蛋白质在5-aza-2dC 处理后的HL-60 细胞中表达上调,6个蛋白质表达下调或缺失.Western 印迹结果证实Galectin-1在5-aza-2dC 处理HL-60细胞中表达上调.结论:21个表达上调蛋白质的编码基因可能是HL-60细胞的甲基化失活基因,它们可能与急性髓系白血病发病以及5-aza-2-dC抗人急性髓系白血病细胞作用有关.

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