透射电子显微镜样品染色装置的改进
摘要
超薄切片染色是电镜生物样品制备的最后一步,染色好坏直接影响电镜照片的质量。在透射电镜生物样品制备过程中,由于生物样品本身的反差低,需要经过重金属染色才能在电镜下显示清晰的超微结构。利用重金属离子对不同细胞结构的结合能力不同,使细胞内各结构对电子产生不同的散射能力,显示在荧光屏上产生不同的反差[1,2]。目前本实验室用的染色方法是漂浮式液滴法[3]。该方法操作时需要反复用游丝镊子夹取铜网,在倒扣前还要先确认切片在铜网的哪一面,需要把有切片的一面与染液接触,这样非常耗时,同一批铜网染色时间前后不能保持一致。其次,切片只有一面与染液接触,染色不充分,且液滴表面易干燥,空气接触多,易造成污染。在实际工作中,生物样品染色结束后通常会有各种不尽人意的结果,如不明原因的黑色铅污染。分析污染原因时常常因染色时间前后不一致而无法从时间长短上调整染色条件。为避免上述方法存在的问题,本实验中心对染色装置进行改进,目的是大量染色时使同一批染色的铜网,染色条件完全相同,染色液可以与空气隔绝,避免铅染液与空气中的二氧化碳反应生成碳酸铅颗粒而影响电镜观察。
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