实时控制FISH预处理中酶消化的操作

徐明堂(河北省人民医院病理科,石家庄,050051);赵焕芬(河北省人民医院病理科,石家庄,050051);何春年(河北省人民医院病理科,石家庄,050051);康林(河北省人民医院病理科,石家庄,050051);张秀智(河北省人民医院病理科,石家庄,050051);陈琛(河北省人民医院病理科,石家庄,050051);

阅读：645 临床与实验病理学杂志； 2014年30卷9:1053-1054,1055

摘要

荧光原位杂交( fluorescence in situ hybridization, FISH)是通过荧光素标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交,在荧光显微镜下观察探针的杂交信号。在产前诊断、肿瘤遗传学等领域研究得到广泛应用。然而在FISH检测过程中,有多种因素(如组织标本的固定、切片厚度、酶的消化、杂交后洗涤)影响检测结果。其中影响最多的是蛋白酶的预处理,即蛋白酶的种类及消化时间[1-8]。作者在实验中发现,控制消化时间固然重要,但掌握组织或细胞消化的程度更重要。实验中预处理控制水浴温度、酶消化时间,均要达到组织去蛋白的效果,否则难以做出信号满意的FISH标本。本文采用镜下直接观察消化的组织或细胞,判定消化程度,结合消化时间来决定是否终止消化,有效保证FSIH检测的成功,现介绍如下。

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