慢病毒载体法在制备转基因小鼠模型中的应用

于莉娜(南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学教研室,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广州,510515);张庆玲(南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学教研室,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广州,510515);丁彦青(南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学教研室,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组

阅读：895 临床与实验病理学杂志； 2009年25卷5

摘要

目的改进慢病毒载体法制备转基因小鼠的操作技术,分别从病毒浓缩、受精卵显微注射进针点和如何提高病毒注射效率等方面探讨慢病毒显微注射技术的最佳方案.方法超速离心获得浓缩慢病毒,通过卵周隙显微注射技术感染小鼠受精卵,比较不同注射点显微注射后受精卵存活率及发育情况.结果受精卵1点和5点作为注射点的卵周隙注射组可有效避免注射针与卵膜的直接碰触,减少对受精卵的损伤,胚胎存活率较常规中轴3点作为注射点组显著提高(P<0.01).适当的病毒滴度和注入量、操作细节、注射针口径等均可影响注射后受精卵存活率和感染率.结论卵周隙显微注射过程中选择适当的注射点以及部分操作的改进,可显著提高受精卵的存活率,为提高转基因小鼠模型的制备效率提供参考.

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