DAB染色中的两个问题及对策
摘要
免疫组化技术在组织学研究和病理诊断尤其是肿瘤鉴别诊断中起着重要作用,在蛋白抗原的细胞准确定位上是其他蛋白检测方法无法相比的.然而,要做好一张漂亮的染色切片,也不是十分容易的事.下面我将工作中发现的问题以及解决方法列出,以供参考.1 DAB染色后切片呈阴性结果1.1原因①抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误.另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索最佳浓度.②抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须进行充分的抗原修复才能打开抗原表位,与抗体结合;建议高压修复6 min,柠檬酸.③组织切片本身抗原含量低.④血清封闭时间过长.⑤DAB孵育时间过短.⑥细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应.⑦开始做免疫组化,一定要首先做阳性对照片,以排除抗体外的问题.
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