microRNA-21调节宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4的表达研究

王晓玫(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020);许静(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020);成志强(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020);彭全洲(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020);胡锦涛(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020);高利昆(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020);张石芬(暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院

阅读：365 诊断病理学杂志； 2011年18卷3

摘要

目的探讨microRNA(miR)-21-反义寡核苷酸(ASODN)对宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4基因表达、细胞增殖与凋亡的影响.方法宫颈鳞癌SiHa细胞分3组,采用LipofectamineTM2000转染试剂,miR-21调控组转染miR-21抑制剂的ASODN,miR-21抑制剂阴性对照的ASODN,空白对照组不转染.Cell Titer和荧光TUNEL分别检测转染前后SiHa细胞增殖和凋亡的变化,流式细胞仪分析细胞周期,实时RT-PCR检测miR-21和PDCD4mRNA水平表达,Western blot检测靶蛋白PDCD4表达.结果 AS-miR-21组与阴性、空白对照组相比,SiHa细胞生长明显抑制,而阴性和空白对照组比较无明显差异;细胞凋亡率分别为(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%和(3.4±0.36)%;细胞周期结果显示AS-miR-21组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,与对照组间差异显著(P＜0.05);实时RT-PCR结果显示,miR-21表达下降而PDCD4表达升高.Western blot检测结果显示,PDCD4表达AS-miR-21组明显高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05).结论 AS-miR-21可有效抑制miR-21在宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达并上调PDCD4基因表达,发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用.

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