PCR试验加样过程中无DNA原则控制污染的探讨

蒋会勇(南方医科大学,南方医院病理科,广州,510515);李海军(南方医科大学,南方医院病理科,广州,510515);韩西群(南方医科大学,南方医院病理科,广州,510515);贺莉(南方医科大学,南方医院病理科,广州,510515);赵彤(南方医科大学,南方医院病理科,广州,510515);

阅读：349 诊断病理学杂志； 2005年12卷1

摘要

目的探究在PCR操作过程中如何预防污染的一些基本操作方法.方法首先制定了PCR操作过程中的无DNA原则,对实验室的划分,操作总原则,Eppendorf管开、关,有螺旋的离心管开、关,装有反应体系Eppendorf管的放置,标记反应管的操作,移液器的使用方法等进行规范化,最大限度地避免DNA污染反应体系.然后通过扩增新鲜扁桃体组织中珠蛋白基因及模拟手套被质粒污染的情况下扩增质粒基因,验证该无DNA操作过程对避免污染的有效性.结果按本实验的规范方法进行操作,所有阴性对照均未出现假阳性.结论采用这种无DNA原则进行PCR操作,是控制反应体系污染的一种有效方法.

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