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固定剂及固定时间对DNA提取质量的影响

李海军(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);柳刚(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);蒋会勇(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);贺莉(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);彭宏(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);朱梅刚(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);赵彤(第一军医大学,南方医院病理科,广州,510515);

摘要

目的探讨10%福尔马林、95%乙醇、中性缓冲福尔马林、4%多聚甲醛-0.1 mol/L磷酸缓冲液4种固定剂对新鲜组织DNA质量及PCR的影响.方法选取16例单纯性扁桃体炎组织标本的冷冻切片,进行不同时段的固定,比较提取物OD260nm/OD280nm比值、DNA浓度和PCR结果.结果各组之间同一时间、同一组内不同时间OD260nm/OD280nm比值比较差异不显著(P>0.05);而同一固定时间段,个别组间DNA浓度以及同一组内不同时间DNA浓度差异显著(P<0.05).固定72h后,各组的PCR阳性率分别为66.7%、100%、93.3%、80%、100%.结论95%乙醇固定效果最佳,其余3组固定剂随固定时间的延长,PCR阳性率逐渐降低.

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