柳洋(广州市疾病预防控制中心病理科,510080);文继舫(410078,长沙,中南大学湘雅基础医学院病理学教研室);李景和(410078,长沙,中南大学湘雅基础医学院病理学教研室);肖德胜(410078,长沙,中南大学湘雅基础医学院病理学教研室);胡忠良(410078,长沙,中南大学湘雅基础医学院病理学教研室);罗庚求(410078,长沙,中南大学湘雅基础医学院病理学教研室);
摘要
目的研究DPC4基因转染对结肠癌细胞生长及p21WAF1 mRNA表达的影响.方法构建pcDNA3.1-DPC4真核表达质粒,利用脂质体转染技术将pcDNA3.1质粒和pcDNA3.1-DPC4质粒分别导入结肠癌细胞系SW620;采用免疫细胞化学和Western蛋白印迹检测细胞中DPC4基因的表达;通过检测细胞生长曲线、克隆形成实验研究DPC4基因转染对SW620细胞生长的抑制作用.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞内p21WAF1 mRNA的表达.结果转染DPC4基因后,在SW620细胞中可检测到高表达的DPC4蛋白;细胞生长倍增时间(74 h)明显延长;细胞克隆形成率(21%)明显降低.DPC4基因转染后SW620细胞p21WAF1mRNA含量增加.结论 DPC4基因的高表达能够抑制结肠癌细胞的生长,DPC4基因可能通过诱导p21WAF1基因的表达而抑制结肠癌细胞的生长.
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