肝癌耐药细胞的形态学及微小RNA表达谱分析

卓丽娟(福建医科大学基础医学院病理学系,福州,350004);陈虹(福建医科大学附属第一医院病理科);吴敏霞(福建医科大学基础医学院病理学系,福州,350004);高美钦(福建医科大学基础医学院病理学系,福州,350004);陈水平(福建医科大学基础医学院病理学系,福州,350004);黄爱民(福建医科大学基础医学院病理学系,福州,350004);

阅读：627 中华病理学杂志； 2013年42卷9

摘要

目的比较3株肝癌耐药细胞(Huh-7/ADM、Huh-7/CBP、Huh-7/MMC)与亲本肝癌细胞Huh-7的形态学差异；分析这3株肝癌耐药细胞及Huh-7的miRNA表达谱,筛选3株耐药细胞中异常表达的微小RNA(miRNA).方法光学显微镜下观察各细胞株细胞形态学特点、透射电镜下观察各细胞株细胞内超微结构特点.miRNA芯片检测各细胞株miRNA表达谱,real-time定量PCR(qPCR)法验证芯片结果.结果镜下见肝癌耐药细胞比亲本肝癌细胞Huh-7更具多形性,核异型性亦增加；细胞周边微绒毛减少；胞质增多,胞质内细胞器含量增加,并出现脂滴、糖原等成分.miRNA表达谱分析显示:与Huh-7相比,有32个miRNA在3种肝癌耐药细胞株中表达同时上调,有22个miRNA在3种耐药细胞株中表达同时下调.real-time qPCR检测证实miR-15a、miR-16、miR-27b、miR-30b、miR-146a、miR-146b-5p、miR-181a、miR-181d、miR-194在各肝癌耐药细胞中表达同时上调.结论耐药细胞异型性增加,筛选出的肝癌耐药细胞中异常表达miRNA,可为研究肝癌多药耐药与miRNA的相关性提供依据.

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