于宝华(复旦大学附属肿瘤医院,病理科,复旦大学上海医学院肿瘤学系,200032);周晓燕(复旦大学附属肿瘤医院,病理科,复旦大学上海医学院肿瘤学系,200032);张铁成(江苏省淮安市第一人民医院肿瘤科);张太明(复旦大学附属肿瘤医院,病理科,复旦大学上海医学院肿瘤学系,200032);施达仁(复旦大学附属肿瘤医院,病理科,复旦大学上海医学院肿瘤学系,200032);
摘要
目的 建立人弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞株LY8裸鼠皮下移植瘤模型并观察其生长特性,为探讨淋巴瘤发病机制及治疗策略提供手段.方法 将人DLBCL细胞株LY8种植于裸鼠右前肢肩胛背侧皮下,成瘤后无菌套管针抽吸法抽取约1.5 mm×1.5 mm×1.5 mm大小组织块进行皮下种植,观察成瘤率和组织形态特点;用免疫组织化学EnVision法观察白细胞共同抗原(LCA)、CD20、CD79α、Ki-67、CD3、CD45RO、bcl-6、MUM-1、CD10、bcl-2等指标的表达;用聚合酶链反应(PCR)扩增检测移植瘤和LY8细胞株的IgH基因克隆性重排和针对3个微卫星位点(D14S68、D18S69、D20S199)的基因组DNA微卫星序列.结果 运用LY8细胞株成功进行了人DLBCL的种植,且生长稳定,已传至第9代,共移植裸鼠124只,其中114只成瘤,成瘤率达91.9%.每代移植瘤的生长特点均相似,于移植后约2周长出,约在3周左右长至最大径1.3 cm,随后即进入快速生长期,4周左右达2.0 cm大小.移植瘤形态符合DLBCL,肿瘤细胞免疫组织化学显色呈LCA、CD20、CD79α、bcl-6、MUM-1、CD10、bcl-2阳性;裸鼠移植瘤与LY8有相同的IgH基因克隆性重排,经3个位点的微卫星引物扩增后获得相同片段的产物.表明移植瘤与人DLBCL细胞相似,并证实了其生长的稳定性和可重复性.结论 建立了可稳定传代的DLBCL的裸鼠模型,为研究人DLBCL的生物学特性及试验治疗提供了较理想的动物模型.
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