应用蛋白质组学分析结直肠癌促泌素和糖调节蛋白78蛋白变化及其意义

邢晓明(青岛大学医学院附属医院病理科,266000);王英红(310013,杭州,浙江大学医学院病理学与病理生理学系);黄琼(310013,杭州,浙江大学医学院病理学与病理生理学系);吕炳建(310013,杭州,浙江大学医学院病理学与病理生理学系);来茂德(310013,杭州,浙江大学医学院病理学与病理生理学系);

阅读：285 中华病理学杂志； 2007年36卷2

摘要

目的分析结直肠癌、配对正常黏膜组织差异表达蛋白质,寻找与结直肠癌发生、发展相关的分子标记物.方法固相pH梯度双向凝胶电泳分离结直肠癌患者配对癌及正常黏膜组织的总蛋白,液相色谱串联质谱鉴定差异表达蛋白质点.半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学(EnVision法)方法检测促泌素(SCGN)及糖调节蛋白78(GRP78)两个差异表达蛋白质及组织定位,并检测54例神经内分泌肿瘤SCGN的表达.结果比较结直肠癌、配对正常黏膜组织蛋白质表达图谱,共获得5倍以上差异蛋白质点35个,癌组织中表达上调15个、下调20个.质谱分析鉴定14个蛋白质.RT-PCR及Western blot证实结直肠癌组织SCGN低表达,免疫组织化学染色发现正常结直肠黏膜神经内分泌细胞及98%(53/54)的神经内分泌肿瘤SCGN阳性.GRP78蛋白在结直肠癌组织中的表达明显高于正常黏膜组织,但在mRNA水平上癌组织和正常组织之间差异无统计学意义.结论双向凝胶电泳结合质谱分析是筛选肿瘤异常表达蛋白质的有效手段,所获得的35个差异表达候选蛋白质可能与结直肠癌的发生、发展有关.SCGN是一个候选神经内分泌标记物,GRP78蛋白表达增高可能涉及翻译后修饰.

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