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β-淀粉样肽对人SH-SY5Y神经细胞膜性脂质和胆碱能受体的影响

齐晓岚(550004,贵阳医学院病理学教研室);单可人(550004,贵阳医学院分子生物学重点实验室);肖雁(550004,贵阳医学院分子生物学重点实验室);刘如玉(550004,贵阳医学院病理学教研室);顾然(550004,贵阳医学院分子生物学重点实验室);官志忠(550004,贵阳医学院病理学教研室);

摘要

目的研究β-淀粉样肽对人SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞膜性脂质和胆碱能受体的影响及其意义.方法选择不同浓度β-淀粉样肽1-42 处理 SH-SY5Y 细胞,用比色法测定细胞四甲基偶氮唑盐(MTT)还原率、脂质过氧化产物(丙二醛)、蛋白氧化产物(蛋白羰基)及磷脂含量,高效液相色谱法测定细胞胆固醇及辅酶Q水平,放射性配体-受体结合实验测定胆碱能受体-配体结合率,Western印迹方法测定细胞膜神经型尼古丁受体亚单位α3及α7蛋白表达水平,并对照研究维生素E的抗氧化作用.结果用低浓度(0.1 μmol/L)β-淀粉样肽处理细胞后即出现MTT还原率和磷脂水平的下降,丙二醛及蛋白羰基水平升高,用较高浓度(1 μmol/L)β-淀粉样肽处理细胞后胆碱能受体-配体结合密度、尼古丁受体亚单位α3,α7蛋白水平及辅酶Q含量降低,但未引起细胞胆固醇含量的改变.维生素E能明显对抗β-淀粉样肽的细胞毒性作用.结论β-淀粉样肽引起细胞膜脂质成分改变以及胆碱能受体水平降低,这些改变可能与其诱导的氧化应激增强有关.

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