PC-1基因表达诱导NIH3T3细胞恶性转化

常晓彤(河北北方医学院,075029);梁瑞霞(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);周建光(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);张浩(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);李杰之(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);王健(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);张惠(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);黄翠芬(100850,北京,军事医学科学院生物工程研究所);

阅读：535 中华病理学杂志； 2005年34卷1

摘要

目的通过建立稳定表达外源PC-1基因的小鼠成纤维细胞株,初步探讨PC-1基因表达对肿瘤发生、发展的影响. 方法通过脂质体介导的方法,将真核表达载体pcDNA3.1(-)/myc-his-pc-1稳定转染NIH3T3细胞,之后利用PCR、逆转录PCR(RT-PCR)技术,确定外源PC-1基因在靶细胞染色体上的整合及在转录水平的表达.通过细胞形态学分析、MTT实验、细胞周期分析、软琼脂集落形成和裸鼠成瘤实验,观察PC-1基因表达对NIH3T3生物学特性的影响.结果建立了稳定转染PC-1基因的NIH3T3细胞株.PC-1基因表达的小鼠成纤维细胞 NIH3T3生长速度加快,在软琼脂上生长并形成集落,接种裸鼠后可成瘤(6/6).结论 PC-1基因在NIH3T3细胞中稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能.

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