加热抗原修复对内源性抗生物素蛋白结合物的影响及其对策
摘要
目的深入研究加热抗原修复对内源性抗生物素蛋白结合物(EABA)的影响程度和范围,以及探讨消除EABA对免疫组织化学染色干扰的对策或方法.方法采用高效、快捷的组织芯片技术、微波加热处理法、免疫组织化学SP染色法及蛋清液封闭法,对甲醛固定石蜡包埋的76种(102份)人体正常组织和88种(577份)人体肿瘤组织以及4种(80份)大鼠正常组织标本进行系统性EABA检查,同时对9种(15份)人体冷冻组织进行EABA检查.结果 (1)冷冻组织中存在EABA;(2)经甲醛固定石蜡包埋后组织中的EABA被封闭;(3)加热抗原修复可造成EABA暴露;(4)EABA暴露的强度各不相同,强者可到强阳性;(5)EABA在组织中的分布形式,既有散在分布也有弥漫分布,主要以颗粒状形式存在于胞质中;(6)EABA广泛存在于上皮源性组织,特别是腺上皮组织(包括正常组织和肿瘤组织),亦存在于部分非上皮组织;(7)EABA暴露的强弱与修复液亦有关,EGTA(pH 9.0)的暴露能力较柠檬酸(pH 6.0)和乙二胺四乙酸二钠(pH 8.0)更强;(8)加热抗原修复暴露的EABA可以被20%蛋清液封闭.结论加热修复可使甲醛固定石蜡包埋组织中的EABA重新暴露,暴露的EABA可广泛见于人体正常和肿瘤组织细胞中,也见于大鼠正常肝、肾、肺、胰组织中,因而可能对正常免疫组织化学染色造成干扰;暴露的EABA可被蛋清液封闭,或采用非生物素检测系统,达到消除EABA对正常免疫组织化学染色干扰的目的.
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