蔡广研(100853,北京,解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室);陈香美(100853,北京,解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室);王兆霞(100853,北京,解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室);田月(100853,北京,解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室);师锁柱(100853,北京,解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室);
摘要
目的观察不同周龄MRL/lpr狼疮小鼠肾脏明胶酶的表达及其随增龄而发生的活性变化及意义.方法取8、16与24周龄MRL/lpr狼疮小鼠的肾组织进行常规病理检测,利用含有放射自显影的成像乳胶对冷冻肾组织切片进行原位明胶酶活性的检测;利用免疫组织化学检测肾脏明胶酶A与明胶酶B的蛋白表达变化,十二氨基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)明胶酶谱法检测肾脏明胶酶A、B的活性变化.结果 8周龄狼疮小鼠肾组织中仅在血管处检测到明胶酶的活性;16与24周龄狼疮小鼠肾小球内明胶酶的净活性明显增加,在肾小球以及肾小管间质上也可检测到明胶酶的活性.乙二胺四乙酸(EDTA)能够抑制肾脏明胶酶的活性.免疫组织化学与SDS-PAGE明胶酶谱法结果显示其肾组织中明胶酶A与明胶酶B的蛋白质表达及活性均明显增加.结论明胶酶A、B在自发性狼疮小鼠肾炎中的表达及活化随增龄均明显增加,活化态的明胶酶可能在狼疮性肾炎细胞外基质重塑中发挥重要的作用.
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