α7尼古丁受体基因抑制对SH-SY5Y细胞β淀粉样蛋白生成的影响
摘要
目的 通过RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)中α7神经型尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)的基因表达,以了解α7 nAChR对β淀粉样蛋白(Aβ)的影响,进一步探讨阿尔茨海默病的发病机制.方法 SH-SY5Y细胞转染α7 nAChR的小干扰RNA(siRNA),用real-time PCR法和蛋白免疫印迹法分别测定细胞中α7 nAChR、β分泌酶两个亚型(BACE1和BACE2)在mRNA和蛋白表达水平的变化；用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定Aβ1-42含量的变化.结果 转染α7 nAChR siRNA后,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平分别降低了84％和79％(P＜0.01)；BACE1 mRNA及蛋白表达水平分别升高了527％和71％(P＜0.01)；BACE2 mRNA及蛋白表达水平分别降低了58％和75％ (P＜0.01)；Aβ1-42含量升高了208％(P＜0.01).结论 α7 nAChR基因表达抑制后Aβ含量明显升高,其机制可能与BACE1表达上升和BACE2表达抑制有关,这种改变可能与阿尔茨海默病的发病有一定的关系.
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