目的:比较免疫组织化学（IHC）、DNA荧光原位杂交（FISH）及RNA原位杂交不同检测方法检测程序性死亡配体1（PD-L1）之间的一致性。方法:收集南京大学医学院附属鼓楼医院病理科2014—2018年诊断为EB病毒相关性胃癌（EBVaGC）59例，EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤（EBV +DLBCL）27例和三阴性乳腺癌（TNBC）30例。分别运用IHC、FISH及RNA原位杂交（RNAscope）检测PD-L1的状态。 结果:所有样本均成功进行上述3种方法学检测，59例EBVaGC中PD-L1 IHC阳性率为84.7%（50/59），FISH阳性率为10.2%（6/59），RNAscope显示81.4%（48/59）为高表达；27例EBV +DLBCL中PD-L1 IHC阳性率为74.1%（20/27），FISH阳性率为7.4%（2/27），RNAscope显示66.7%（18/27）为高表达；30例TNBC中PD-L1 IHC阳性率为66.7%（20/30），FISH阳性率为16.7%（5/30），RNAscope显示81.5%（22/30）为高表达。检测结果相关性分析显示：IHC与RNAscope相关性为0.759（ P<0.01），IHC和FISH相关性为0.759（ P=0.040），FISH与RNAscope相关性为0.077（ P=0.031）。 结论:PD-L1不同检测方法中，RNAscope与IHC检测一致性较强，FISH与IHC和RNAscope的一致性均较差，单纯依靠IHC诊断PD-L1状态存在误诊的可能，利用RNAscope技术可以检测其mRNA的表达水平。RNAscope是一种评价PD-L1状态的相对准确和客观的方法。