摘要
目的 探讨沉默神经鞘磷脂合成酶1(sphingomyelin synthase 1,SMS1)对卵巢癌细胞HO8910增殖、侵袭和迁移的影响.方法 体外培养卵巢癌HO8910细胞株,设计siRNA-SMS1序列,转染细胞,分为阴性对照组(negative control,NC)、空白对照组(blank control,BC)、siRNA组;利用qRT-PCR技术检测各组细胞SMS1 mRNA相对表达量.MTT法检测HO8910细胞增殖情况、划痕实验检测转染后HO8910细胞迁移能力.Transwell实验检测细胞侵袭能力.薄层层析法检测HO8910细胞中SMS1活性、Cer水平.酸性神经鞘磷脂(sphingomyelin,SM)酶试剂盒、卵磷脂(phosphatidylcholine,PC)试剂盒分别检测HO8910细胞中SM、PC水平.结果 卵巢癌细胞中SMS1 mRMA及蛋白相对表达量比正常卵巢细胞显著升高(P<0.05);转染48 h后,siRNA组细胞中SMS1 mRMA及蛋白相对表达量、SMS1酶活性比NC组与BC组均显著降低(P<0.05);siRNA-SMS1组A570比BC组与NC组显著降低(P<0.05);迁移指数、侵袭细胞数较BC组与NC组显著降低(P<0.05);与NC、BC组相比,siRNA组HO8910细胞中SM水平显著降低(P<0.05),Cer水平显著升高(P<0.05).结论 SMS1基因沉默可抑制卵巢癌HO8910细胞增殖、迁移及侵袭能力,可能与下调细胞中SM水平、上调Cer水平有关.
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