MDA-MB-231细胞在乏氧条件下通过外泌体传递miR-221、 miR-222增强乳腺癌细胞侵袭和迁移能力
摘要
目的 探讨乳腺癌细胞MDA-MB-231在乏氧条件下分泌的外泌体对肿瘤细胞侵袭和迁移的影响.方法 利用差速离心法分离外泌体,并通过动态光散射和透射电镜对外泌体的粒径、形态进行表征.通过对外泌体进行PKH26染色,进而观察肿瘤细胞对外泌体的摄取情况.应用qRT-PCR法检测肿瘤细胞及外泌体中miR-221、miR-222的含量.Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力.Western blot法检测MDA-MB-231细胞中上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)的表达.结果 MDA-MB-231细胞经乏氧处理后,其侵袭和迁移能力增强,并且N-cadherin和vimentin的表达上调;乏氧处理的肿瘤细胞分泌的外泌体通过传递miR-221、miR-222,促进MDA-MB-231细胞的EMT进展.结论 MDA-MB-231细胞在乏氧条件下,可以通过外泌体传递miR-221、miR-222增加癌细胞侵袭和迁移能力.
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