过表达PTEN基因对甲状腺髓样癌细胞生长及细胞周期的影响
摘要
目的:探讨PTEN基因对甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)细胞生长、周期的影响以及作用机制.方法:使用酶切酶连的方法构建真核表达载体pcDNA3.1-PTEN,采用脂质体转染法将其转入pA10RP8细胞中.实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞内PTEN表达水平的变化,Western印迹法检测PTEN,Ki-67,p21,cyclin D1蛋白表达水平的变化;CCK-8法和平板克隆试验检测PTEN对pA10RP8细胞增殖的影响;细胞流式术检测pA10RP8细胞周期的变化.结果:成功构建了PTEN真核表达载体.转染pcDNA3.1-PTEN质粒的pA10RP8细胞PTEN和p21表达上调,Ki-67和cyclin Dl蛋白表达下调;转染pcDNA3.1-PTEN质粒的pA10RP8细胞生长增殖受到抑制;细胞在G0/G1期比例增加,发生周期阻滞.结论:过表达PTEN能够抑制pA10RP8细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞,其机制可能与周期蛋白p21上调和cyclinD1下调表达有关.
我要评论
共0条评论