无醛固定液与甲醛固定液对DNA保存效果比较
摘要
随着分子生物学技术的不断发展及疾病相关基因研究的不断深入,分子病理学检测已经成为病理诊断的重要辅助手段,广泛运用于临床实践.特别是近几年随着靶向治疗的发展需要对肿瘤基因分型,分子生物学技术中要求使用甲醛固定、石蜡包埋的组织块作为检测的主要对象.但甲醛固定组织会导致基因组DNA断裂.甲醛与蛋白质的广泛交联阻碍核酸的定量分析并局限了DNA片段的PCR扩增产物的长度[1].而且随着时间的推移,这种交联会越来越严重,影响高质量DNA和(或)RNA的提取效率[2].研究显示,经10％中性福尔马林固定的组织超过6个月后不可用于DNA突变检测[3].因此,其在分子学方法的适用性上受到限制[4].本实验通过配制3种无醛固定液对组织进行固定,通过基因组DNA的提取,对总DNA浓度、纯度、完整性的检测以及对GAPDH基因的PCR扩增,并以10％中性福尔马林作为对照来比较不同固定液对DNA保存方面的影响,试图建立新的高质量的组织固定液.
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