慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞MIF对VEGF-C表达的影响

张劲男(桂林医学院研究生学院,桂林,541000);张光波(苏州大学附属第一医院免疫实验室,苏州,215000);乔军利(桂林医学院研究生学院,桂林,541000);杨苏梅(桂林医学院研究生学院,桂林,541000);李泰勋(桂林医学院研究生学院,桂林,541000);洪勇(桂林医学院附属南溪山医院外科,桂林,541000);

阅读：384 临床与实验病理学杂志； 2015年31卷12

摘要

目的探讨慢病毒介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的下调作用,分析MIF与血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在乳腺癌细胞中表达的相关性.方法构建慢病毒/siRNA载体,转染乳腺癌MCF-7细胞.倒置荧光显微镜观察siRNA转染效率,实时荧光定量PCR检测MIF与VEGF-C的mRNA表达,Western blot法检测乳腺癌细胞中MIF蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中VEGF-C分泌情况.结果成功构建稳定低表达MIF的乳腺癌细胞株.慢病毒介导的siRNA对人乳腺癌细胞MCF-7的转染效率超过80％,其能有效阻断MIF mRNA和蛋白的表达,同时VEGF-C的表达水平相应降低.结论构建的慢病毒载体能有效阻断乳腺癌细胞中MIF的表达.MIF可以调控乳腺癌细胞VEGF-C的表达.

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慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞MIF对VEGF-C表达的影响

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