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辐射致雄性小鼠不育症模型的建立及生精细胞损伤的初步分析

张烨敏(解放军第85医院妇产科,上海200052第二军医大学附属长海医院妇产科,上海200433);欧俊(上海交通大学附属仁济医院生殖中心,上海,200135);焦婷婷(第二军医大学附属长海医院妇产科,上海200433解放军北京军区总医院生殖中心,北京100700);邹冬芳(解放军第85医院妇产科,上海,200052);孙健(解放军第85医院妇产科,上海,200052);惠宁(第二军医大学附属长海医院妇产科,上海,200433);

摘要

目的:构建辐射致雄性小鼠不育症模型,并对模型小鼠的生精细胞损伤进行初步分析。方法:不育症模型构建:65只雄性C57BL/6小鼠随机分为7组,正常对照组(A组)及6组60Co γ照射组,后者包括B组(12 Gy)、C组(6+6 Gy)、D组(10 Gy)、E组(6+4 Gy)、F组(8 Gy)、G组(4+4 Gy)。观察分析小鼠死亡情况(24w)及30、50、70 d受孕率。生精细胞损伤分析:72只雄鼠随机分为4组:正常对照组、6+4 Gy组、4+4 Gy组、6 Gy组。30、50、70 d观察睾丸组织切片(HE染色)并评估其生精功能( Johnsen评分);对PLZF阳性标记的精原干细胞(免疫组化法)计数。结果:A、E、F、G组生存时间较长,B、C组生存时间较短。30、50、70 d,D、E组受孕率均为0%。各照射组Johnsen评分均低于对照组(P<0.05);6+4 Gy组的PLZF阳性细胞计数呈逐渐上升趋势,但均明显低于对照组(P<0.05)。结论:6+4 Gy的60Co-γ射线照射7周龄的C57BL/6雄性小鼠,可以构建不育症模型。模型小鼠的PLZF标记的精原干细胞计数虽然低于对照组,但并非完全消失,提示不育症的原因并非精原干细胞的完全消亡。

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