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TRAF6基因对宫颈癌细胞体外生物学行为的影响及其相关机制

周小钰(南京医科大学附属常州市第二人民医院阳湖院区妇产科,江苏常州,213003);蒋学莲(南京医科大学附属常州市第二人民医院阳湖院区妇产科,江苏常州,213003);巫可珍(南京医科大学附属常州市第二人民医院阳湖院区妇产科,江苏常州,213003);周榛(南京医科大学附属常州市第二人民医院阳湖院区妇产科,江苏常州,213003);邓建忠(江苏大学附属武进医院肿瘤科,江苏常州,213017);金建华(江苏大学附属武进医院肿瘤科,江苏常州,213017);孙阳艳(东南大学医学院附属江阴医院妇产科,江苏江阴,

摘要

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因对于宫颈癌细胞生长、增殖、凋亡及浸润转移等生物学行为的影响,为将来人宫颈癌的生物治疗提供实验依据.方法:采用Western印迹方法检测TRAF6在宫颈癌细胞系(Hela,SiHa,CaSki和C33A)中的表达,构建TRAF6-shRNA干扰表达载体并转染人宫颈癌Hela细胞,而后使用MTT法、流式细胞仪分析法、Transwell侵袭小室实验法等方法分析TRAF6对Hela细胞活力、周期、凋亡以及迁移等生物学行为的影响,同时检测TRAF6对其靶基因NF-κB表达的影响,以及Cyclin D1,easpase 3和MMP-9等蛋白影响.结果:TRAF6在宫颈癌细胞系(Hela,SiHa,CaSki及C33A)中高表达,TRAF6 shRNA转染组Hela细胞的活力、增殖能力以及迁移能力明显低于阴性对照组和空白对照组Hela细胞(P<0.05),TRAF6 shRNA转染组发生凋亡的Hela细胞所占比例明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),阴性对照组和空白对照组Hela细胞的活力、增殖能力、凋亡情况以及迁移能力无明显差异;TRAF6 shRNA转染组Hela细胞中NF-κB,Cyclin D1和MMP-9蛋白表达水平明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),caspase 3蛋白表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),NF-κB,Cyclin D1,caspase 3和MMP-9在阴性对照组和空白对照组表达没有明显变化.结论:TRAF6基因可能具有促进Hela细胞生长增殖及其侵袭迁移能力,抑制Hela细胞凋亡的作用,TRAF6基因的表达下调可能与人宫颈癌Hela细胞迁移能力下降、凋亡能力增加有关.

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