李金凤(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);刘文礼(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);史小娟(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);刘伟(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);汉建忠(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);万静(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);罗自强(中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078);
摘要
目的:比较Percoll非连续密度梯度离心法、Ficoll-Hypaque密度梯度离心法、裂解红细胞法和Dextran作用下红细胞自然沉降法四种常用的人中性粒细胞分离方法.方法:取健康人外周静脉血,分别采用以上四种方法进行中性粒细胞分离,对其细胞纯度、回收率、存活率进行比较.结果:Percoll非连续密度梯度离心法与Ficou-Hypaque密度梯度离心法分离得到的细胞纯度均大于90%,两者间比较无统计学差异(P>0.05);裂解红细胞法和Dextran作用下红细胞自然沉降法分离得到的细胞纯度略低于PercoU非连续密度梯度离心法(P<0.01)与Ficou-Hypaque密度梯度离心法(P<0.05).Dextran作用下红细胞自然沉降法的回收率低于Percoll非连续密度梯度离心法(P<0.01)、Ficoll.Hypaque密度梯度离心法(P<0.01)和裂解红细胞法(P<0.05);Pereoll非连续密度梯度离心法回收的中性粒细胞存活率明显高于Ficoll-Hypaque密度梯度离心法(P<0.05),裂解红细胞法(P<0.01)和Dextran作用下红细胞自然沉降法(P<0.01).结论:Percoll非连续密度梯度离心法分离中性粒细胞,纯化程度好,回收率高,是一种简单、高效的中性粒细胞分离方法,适于临床和科研中广泛应用.
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