张文静(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);易红(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);李茂玉(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);张鹏飞(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);李萃(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);汤参娥(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008);阮林(中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点
摘要
目的:比较5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2-dC)处理鼻咽癌细胞前后蛋白质组的差异,为筛选鼻咽癌的甲基化失活基因提供依据.方法:用去甲基化药物5-aza-2-dC处理鼻咽癌细胞系5-8F细胞,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离5-aza-2-dC处理与未处理5-8F细胞的蛋白质,PDQuest图像分析软件识别药物处理与未处理5-8F细胞的差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质.Western印迹法检测差异蛋白质nm23-H1在药物处理与未处理5-8F细胞中的表达水平.结果:建立了5-aza-2-dC处理与未处理5-8F细胞蛋白质的2-DE图谱,识别了49个差异表达的蛋白质点,鉴定了33个差异表达的蛋白质,其中15个蛋白质在5-aza-2-dC处理5-8F后表达上调.Western印迹分析证实了nm23-H1在药物处理与未处理5-8F细胞中的差异表达水平.结论:15个5-aza-2-dC处理后表达上调蛋白质的编码基因可能是5-8F细胞的甲基化沉默基因.
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