混合血清封闭降低石蜡切片中免疫荧光双重染色非特异性荧光背景的应用

李丽(四川大学华西医院病理研究室,成都,610000);曹德宏(四川大学华西医院泌尿外科,成都,610000);陈菲(四川大学华西医院病理研究室,成都,610000);杨群(四川省医学科学院四川省人民医院病理科,成都,610000);步宏(四川大学华西医院病理研究室,成都,610000);

阅读：1714 临床与实验病理学杂志； 2015年31卷8

摘要

间接法免疫荧光双重染色(indirect immunofluorescence double-staining)是用未标记荧光素的两种不同种属一抗孵育组织或细胞，再用两种不同荧光素标记的荧光二抗孵育组织或细胞，在普通荧光显微镜/激光共聚焦显微镜下选择两种相应的激发光进行观察，从而对两种抗原分别进行定位和定量的方法。目前，随着Alexa Fluor 新型窄谱染料[1]和激光共聚焦显微镜技术的广泛应用[2]，石蜡切片免疫荧光染色技术的应用越来越广泛。但研究表明石蜡切片组织血管腔内红细胞、血浆蛋白因甲醛残留，易出现非特异性强荧光，对实验结果造成明显干扰[3]。作者以小鼠胰腺石蜡切片组织胰岛素(Insulin)和胰高血糖素(Glucagon)蛋白进行免疫荧光双重染色为例，首次用混合血清封闭的方法降低石蜡组织内非特异性荧光背景，现介绍如下。

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混合血清封闭降低石蜡切片中免疫荧光双重染色非特异性荧光背景的应用

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