RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

毛俊(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);牟秋菊(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);李连宏(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);陶雅军(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);范姝君(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);王波(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);于晓棠(大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044);

阅读：268 临床与实验病理学杂志； 2012年28卷1

摘要

目的探讨RNA干扰技术沉默Notch1基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法设计并合成靶向Notch1基因的小分子干扰RNA质粒,在转染试剂Sofast介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法检测转染前、后Notch1基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体;cck8比色法检测分析各组细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡比例;Western blot法检测转染各组MCF-7细胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白表达.结果 Notch1-shRNA能有效封闭Notch1基因的表达,Notch1基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);转染48 h后细胞凋亡比例增加(P<0.01).NF-κB蛋白水平表达降低,Caspase-3蛋白表达水平增高.结论利用RNA干扰技术沉默Notch1基因的表达可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节相关凋亡蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡和增殖,靶向Notch1的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值.

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