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高表达p27基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

尤程程(三峡大学医学院病理教研室,宜昌,443002);王艳林(三峡大学分子生物学研究所,宜昌,443002);尤昌昌(湖北医药学院药护学院,十堰,442000);黄益玲(三峡大学医学院病理教研室,宜昌,443002);任东明(三峡大学医学院病理教研室,宜昌,443002);黄利鸣(三峡大学医学院病理教研室,宜昌,443002);

摘要

目的 构建抑癌基因p27高表达细胞株,研究其对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法 运用RT-PCR技术从HeLa RNA中扩增p27 cDNA,连接酶连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),所得的重组质粒pcDNA3.1(+)-p27用脂质体法转染子宫颈癌HeLa细胞,使用RT-PCR以及Western blot法筛选p27基因高表达的细胞株.MTT法和流式细胞术检测p27基因高表达对细胞增殖的影响.结果 成功获得p27高表达的HeLa细胞株.细胞增殖分析和流式细胞术结果显示,p27基因高表达对细胞增殖有抑制作用,并明显增加G1期的细胞数(由44.4%增加到59%,P<0.05).结论 p27基因在HeLa细胞中高表达能通过抑制细胞G1/S转换从而抑制细胞增殖,提示p27基因可能成为子宫颈癌基因治疗的靶基因.

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