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hsMAD2基因及Nocodazole对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响

李擒龙(第四军医大学西京医院病理科、肿瘤生物学国家重点实验室,西安,710033);王文亮(第四军医大学西京医院病理科、肿瘤生物学国家重点实验室,西安,710033);张晓晖(第四军医大学西京医院病理科、肿瘤生物学国家重点实验室,西安,710033);晏伟(第四军医大学西京医院病理科、肿瘤生物学国家重点实验室,西安,710033);成胜权(第四军医大学西京医院小儿科,西安,710033);郭双平(第四军医大学西京医院病理科、肿瘤生物学国家重点实验室,西安,710033);王文勇(第四军医大学西京医院病理科
阅读：419 临床与实验病理学杂志； 2006年22卷5

摘要

目的 观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响.方法 将人全长hs-MAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞,经G418筛选期获得转基因癌细胞克隆,采用免疫细胞化学法、Western blot方法 检测hsMAD2的表达情况.观察细胞形态、测量生长曲线和分裂指数曲线,观察hsMAD2基因对HepG2细胞生长和细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测HepG2细胞周期的变化.然后观察在纺锤体阻滞剂50 nmol/L Nocodazole作用下,hs-MAD2对HepG2细胞的影响.结果 稳定表达外源性hsMAD2蛋白的HepG2细胞生长速度和细胞增殖能力并无变化;流式细胞仪检测结果 显示HepG2-hsMAD2细胞周期G2、S期比例增加,而G1期细胞比例下降,但差异无显著性.经过nocodazole处理后,HepG2-hsMAD2细胞生长速度下降,差异具有显著性,细胞周期出现G2期阻滞.相反,HepG2在受到Nocodazole处理后无明显变化.结论 单纯过表达外源性hsMAD2对细胞无影响.由于hsMAD2蛋白发挥了细胞周期关卡作用,使受到Nocodazole破坏作用的细胞出现细胞周期的阻滞.

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