IGF-IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡的病理学研究

牛朝诗(上安徽省立医院、安徽省立体定向神经外科研究所,);罗其中(上海第二医科大学附属仁济医院神经外科);徐纪文(上海第二医科大学附属仁济医院神经外科);沈建康(上海第二医科大学附属仁济医院神经外科);

阅读：300 临床与实验病理学杂志； 2001年17卷5

摘要

目的:探讨IGF-IR基因的反义硫代磷酸型寡核苷酸对胶质瘤细胞的形态学影响.方法:根据IGF-IR cDNA序列设计正义、反义寡核苷酸片段,并对其部分碱基进行硫代磷酸修饰.体外培养的胶质瘤细胞分别经正义寡核苷酸和反义寡核苷酸处理,应用倒置显微镜活细胞观察、HE染色光镜观察、透射电镜及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法研究IGF-IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡作用.结果:经反义寡核苷酸转染的胶质瘤细胞中,呈现典型的凋亡形态学改变.凋亡细胞最早期表现为细胞体积、容量减少,染色质凝聚,继之染色质集聚于核膜下成新月状或块状;细胞核内染色质可完全固缩成团呈“黑洞”样或萎缩的核破裂形成一些较小的膜包绕的球体位于胞质内,最后出泡形成凋亡小体.DNA琼脂糖凝胶电泳分析经反义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞DNA降解片段,可见有明显的小分子量DNA梯状条带,而野生型和正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞未见DNA梯状条带.结论:IGF-IR所介导的分泌环路IGF-I/IGF-IR,在胶质瘤细胞增殖和维持恶性表型中起重要作用;IGF-IR反义硫代磷酸型寡核苷酸能诱导胶质瘤细胞凋亡.

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