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人附睾蛋白4基因表达下调对卵巢癌细胞生物学行为的影响

周磊(200032,复旦大学附属肿瘤医院检验科复旦大学上海医学院肿瘤学系);肖然(200032,复旦大学附属肿瘤医院检验科复旦大学上海医学院肿瘤学系);陈颖(200032,复旦大学附属肿瘤医院检验科复旦大学上海医学院肿瘤学系);张菁(200032,复旦大学附属肿瘤医院检验科复旦大学上海医学院肿瘤学系);卢仁泉(200032,复旦大学附属肿瘤医院检验科复旦大学上海医学院肿瘤学系);郭林(200032,复旦大学附属肿瘤医院检验科复旦大学上海医学院肿瘤学系);

摘要

目的 探讨人附睾蛋白4(HE4)基因表达下调对卵巢癌细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响.方法 构建含HE4 shDNA的重组质粒,并将其转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,RNA干扰后,通过即时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot等测定HE4表达下调情况;同时利用平板克隆形成实验、细胞黏附实验、测定稳定转染细胞的侵袭力改变等方法,比较分析HE4相关的生物学效应.结果 Western blot以及qRT-PCR结果均提示HE4干扰重组质粒构建成功,稳定转染SKOV3细胞后能显著抑制HE4基因的表达.体外实验显示,HE4表达下调的细胞侵袭能力明显下降(P<0.05),黏附率明显下降到27.3%,而增殖能力较转染前无明显变化.结论 所构建的HE4干扰重组表达载体能有效抑制HE4基因表达,而HE4表达下调对卵巢癌的细胞黏附和侵袭能力降低.

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