孙洋(河南省肿瘤病理重点实验室,郑州大学第一附属医院病理科,450052);李珊珊(河南省肿瘤病理重点实验室,郑州大学第一附属医院病理科,450052);王新华(河南省肿瘤病理重点实验室,郑州大学第一附属医院病理科,450052);WANGXiao-jun(HenanKeyLaboratoryofTumorPathology,CollegeofBasicMedicalScience,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China);阎爱华(郑州大学基础医学院癌前研究室)
摘要
目的 探讨食管鳞状细胞癌中转化生长因子β1(TGFβ1)与上皮间质转化的关系以及阻断TGFβ1通路对食管鳞状细胞癌上皮间质转化的影响.方法 将化学合成的TGFβ1反义寡核苷酸(TGFβ1-ASODN)转染食管鳞状细胞癌细胞株EC9706,采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测阻断前后对TGFβ1活性的影响以及对上皮性标志物E-cadherin及间质性标志物波形蛋白表达的影响;观察TGFβ1-ASODN转染前后细胞形态学的变化;采用细胞划痕试验检测TGFβ1-ASODN转染前后细胞迁移能力的变化.结果 转染TGFβ1-ASODN可有效的抑制EC9706细胞中TGFβ1的活性,其mRNA(0.25±0.07)及蛋白(35.07%±1.42%)的表达均明显低于转染前mRNA(0.43±0.09)及蛋白(43.57%±1.77%)的水平(χ2=13.847及χ2=84.120,均P<0.05);并提高E-cadherin的表达,抑制波形蛋白的表达.转染后E-cadherin mRNA(0.38±0.09)及蛋白(17.13%±1.45%)的表达明显高于转染前mRNA(0.22±0.06)及蛋白(12.53%±1.31%)的水平(χ2=0.160及χ2=40.008,均P<0.05);波形蛋白mRNA(0.73±0.07)及蛋白(14.15%±1.46%)的表达低于转染前mRNA(0.89±0.09)及蛋白(17.97%±1.42%)水平(χ2=0.160及χ2=21.103,均P<0.05).TGFβ1-ASODN转染可明显抑制细胞的运动能力,转染后细胞迁移距离(0.45±0.05)比转染前(0.81±0.11)明显缩小(χ2=16.854,P<0.05).结论 TGFβ1可能参与了食管鳞状细胞癌的上皮间质转化,TGFβ1-ASODN可导致食管鳞状细胞癌细胞上皮性标志物E-cadherin表达上调、间质性标志物波形蛋白表达下调、形态发生改变以及细胞移动能力降低,阻断TGFβ1信号可抑制食管鳞状细胞癌细胞的上皮间质转化.
共0条评论