李智(510089,广州,中山大学中山医学院病理学教研室);林素暇(510089,广州,中山大学中山医学院病理学教研室);梁英杰(510089,广州,中山大学中山医学院病理学教研室);
摘要
目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF) 体外提高鼻咽癌细胞侵袭能力的原因,探讨鼻咽癌细胞早期发生侵袭和转移的机制.方法采用微孔迁移分析法(micron-migration assay)检测鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2在细胞因子MIF诱导下通过8 μm直径微孔的细胞数量变化,采用Western蛋白印迹法、流式细胞术和酶联免疫吸附法检测侵袭转移相关因子基质金属蛋白酶2、9(MMP2,MMP9)及白介素8(IL-8)在此过程中的相应改变.结果 (1)经MIF诱导后,CNE-1通过8 μm微孔的细胞数由原来的23.7±11.02增加至113.7±20.9,CNE-2则由原来的34.7±7.41增加至311.3±48.9,差异均呈显著性 (P=0.005,P=0.001).(2)经MIF诱导后,癌细胞表达MMP9蛋白的细胞比例均明显增加,CNE-1细胞由28.5%±2.45%增加至82.4%±3.49%(P=0.001),而CNE-2细胞则由刺激前的32.8%±3.48%增加至86.1%±1.62%(P=0.002).同时癌细胞MMP9蛋白表达强度也显著增强,CNE-1和CNE-2细胞MMP9蛋白的平均相对强度均比诱导前提高3倍以上(P<0.05).但MIF刺激前后,MMP2蛋白的细胞表达数量和表达强度在两株细胞中却未见明显变化(P值均大于0.05).(3)MIF诱导后,CNE-2细胞培养上清液中的IL-8浓度为1201.8±593.3 pg/ml,高于未经刺激CNE-2细胞上清液中IL-8浓度(32.7±20.1 pg/ml,P=0.026).但在CNE-1细胞系中IL-8浓度却未呈现有显著性的变化(P=0.581).结论 (1)细胞因子MIF能够提高CNE-1和CNE-2两株鼻咽癌细胞系的体外侵袭能力.(2)细胞因子MIF诱导鼻咽癌细胞MMP9和IL-8表达上调可能是导致鼻咽癌细胞发生早期组织侵袭和淋巴结转移的重要因素.
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