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醛糖还原酶基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞增殖的影响

车祺(200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系);蒋涛(200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系);林伊凤(200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系);李慧(200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系);张农(200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系);
阅读：470 中华病理学杂志； 2005年34卷7

摘要

目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞(MsC)增殖的影响,并对其机制进行初步探讨.方法脂质体转染法将AR基因转入大鼠MsC,蛋白印迹鉴定转染效率. 四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期与凋亡,对比正常MsC和AR转染MsC的生长速度及AR抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)和小牛血清(NBS)促MsC增殖作用的影响.蛋白印迹检测PDGF-BB作用后AR和c-Jun表达的变化,EMSA检测转录因子AP-1的活性.结果 (1) 转染MsC AR表达较正常MsC明显增高;(2) AR转染MsC较正常MsC生长速度快(P<0.01);(3) ARI可部分抑制PDGF-BB对正常MsC、AR转染MsC 以及NBS对AR转染MsC的促增殖作用(P<0.01,P<0.05),而对NBS促正常MsC的增殖无显著影响;(4) PDGF-BB刺激MsC后可上调AR和c-Jun蛋白的表达,ARI可减弱c-Jun的这种表达增高;(5) PDGF-BB可活化转录因子AP-1,而ARI可削弱此作用.结论 AR可能参与了MsC在病理情况下的过度增殖过程,其作用机制与AP-1活化有一定关系.

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