GTPBP4基因对结肠癌HCT116细胞生物学行为及裸鼠成瘤能力的影响及机制
摘要
目的 探讨短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)稳定下调GTPBP4基因对HCT116细胞增殖及体外克隆形成能力、体内成瘤能力的影响,并分析其可能的分子机制.方法 将HCT116细胞随机分为实验组及阴性对照,实验组(shGTPBP4)稳定转染LV-GTPBP4-RNAi慢病毒,阴性对照组(shControl)稳定转染含CON007阴性对照序列慢病毒.嘌呤霉素法筛选稳定细胞株后,利用CCK-8法检测细胞增殖活性;平板克隆实验检测细胞体外克隆形成能力;裸鼠皮下成瘤实验检测细胞体内增殖能力;Westem blot法检测细胞及免疫组化法检测瘤组织中相关蛋白c-Jun、Cyclin D1、BCL-2、Bax的表达.结果 与阴性对照组相比,实验组细胞增殖能力及平板克隆形成能力减弱(P＜0.05),裸鼠皮下成瘤能力减弱(P＜0.01),同时经Western blot及免疫组化法检测两组中c-Jun、Cyclin D1、BCL-2蛋白表达,实验组表达降低,而Bax蛋白表达升高.结论 沉默GTPBP4基因后,结肠癌HCT116细胞体外增殖能力及裸鼠成瘤能力明显受到抑制,可能是通过调控原癌基因c-Jun相关通路影响结肠癌的发生、发展.
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