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敲降缺氧诱导因子的表达量对缺氧条件下肾癌细胞迁移能力的影响

成永忠[1]姜慧琳[1]金红艳[1]

摘要

目的 探讨抑制缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)的表达对缺氧条件下的肾癌细胞活力、凋亡、迁移能力的影响及机制.方法 实验分为5组:对照组(常氧条件)、缺氧组(未转染缺氧条件下细胞)、转染对照组(转染不含目的蛋白的siRNA)、siRNA-HIF1α组、siRNA-HIF2α组.应用MTr法观察细胞的活力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Transwell小室法分析细胞的迁移、侵袭能力变化,Western blot检测细胞中HIF1 α./HIF2α、Cleaved Caspase-3、E-cadherin、Snail蛋白的表达量.结果 缺氧显著降低细胞的凋亡率和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P<0.05),显著增加迁移、侵袭细胞数(P<0.05).与缺氧组相比,siRNA-HIF1α组细胞的凋亡率以及迁移能力的差异无统计学意义;但siRNA-HIF2α组细胞的凋亡率、Cleaved Caspase-3蛋白水平显著增加(P<0.05),其迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05).与对照组相比,抑制HIF1α和HIF2α的表达显著降低E-cadherin的表达(P<0.05)、升高Snail的表达(P<0.05);与缺氧组相比,siRNA-HIF1α组细胞中的E-cadherin、Snail的表达水平差异无统计学意义,siRNA-HIF2α组显著增加E-cadherin的表达水平(P<0.05)、显著降低Snail的表达水平(P<0.05).结论 敲降HIF2α的表达量抑制缺氧环境下肾癌细胞的活力、诱导肾癌细胞凋亡、降低肾癌细胞迁移能力,其作用机制可能与E-cadherin、Snail的表达量变化有关.

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