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Ku80沉默增强鼻咽癌细胞放射敏感性并诱导凋亡

柳艳飞[1]金红艳[1]田勇[1]王晓凤[1]何为[1]韩云峰[2]

摘要

目的:研究Ku80沉默对鼻咽癌细胞系放射敏感性和凋亡的影响.方法:qRT-PCR测定鼻咽癌细胞系和正常鼻咽部细胞系中Ku80 mRNA的相对表达水平;将鼻咽癌细胞系CNE2分成对照组、阴性对照ShRNA组及Ku80 ShRNA组,分别不感染慢病毒、感染阴性ShRNA慢病毒、感染Ku80 shRNA慢病毒,测定3组的感染效率,将上述3组细胞分别照射0,2,4,6,8及10 Gy,测定三组细胞存活率;流式细胞术测定细胞凋亡率.结果:Ku80 mRNA在鼻咽癌细胞系CNE2,CNE1,HONE-1及C666中相对表达量分别为9.0±0.9,8.0±0.3,5.0±0.4及4.0±0.2,Ku80 mRNA在正常鼻咽上皮细胞系NP69中的相对表达量为1.0,Ku80 mRNA在鼻咽癌细胞系中的相对表达量显著高于正常鼻咽上皮细胞系NP69,差异有统计学意义(P<0.05).慢病毒感染后,Ku80 shRNA组Ku80 mRNA的相对表达量为0.1±0.03,显著低于阴性对照shRNA组的0.93±0.04,差异有统计学意义(P<0.001);Ku80 shRNA组Ku80蛋白相对表达量为0.15±0.05,显著低于阴性对照shRNA组的1.0,差异有统计学意义(P<0.001).Ku80 shRNA组的细胞存活率显著低于对照组和阴性对照shRNA组;照射后48 h,Ku80 ShRNA组细胞凋亡率为20.0%±0.9%,对照组及阴性对照ShRNA组凋亡率分别为4.3%±0.8%,5.0%±0.8%,Ku80 ShRNA组凋亡率显著高于对照组和阴性对照ShRNA组.结论:Ku80沉默表达可增强鼻咽癌细胞放射敏感性,并诱导细胞凋亡,沉默Ku80表达有望成为鼻咽癌放射增敏的靶点.

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